紫外可見分光光度計原理和操作步驟

紫外可見分光光度計原理是：

　　分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息?？梢杂脴藴使庾V圖再結(jié)合其它手段進行定性分析。

　　根據(jù)Lambert-Beer定律：A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)b為液池厚度，c為溶液濃度)可以對溶液進行定量分析。

　　基本操作:

　　(1)通電---儀器自檢----預熱20min;

　　(2)用鍵設(shè)置測試方式:透射比(T),吸光度(A),已知標樣濃度方式(C)和已知標樣濃度斜率(K)方式;

　　(3)波長選擇:用波長調(diào)節(jié)旋鈕設(shè)置所需的單色光波長;

　　(4)放樣順序:打開樣品室蓋,在1~4號放置比色皿槽中,依次放入%T校具(黑體),參比液,樣品液1和樣品液2.

　　(5)校具(黑體)校"0.000":將%T校具(黑體)置入光路,在T方式下按"%T"鍵,此時儀器自動校正后顯示"0.000"

　　(6)參比液校"100"%T或"0.000"A:將參比液拉入光路中,按"0A/100%T"鍵調(diào)0A/100%T,此時儀器顯示"BLA",表示儀器正在自動校正,校正完畢后顯示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完畢,可以進行樣品測定.

　　(7)樣品測定:將兩樣品液分別拉入光路中,此時若在"T"方式下則可依次顯示樣品的透射比(透光度)若在"A"方式下,則顯示測得的樣品吸光度.